高分辨熔解曲线应用领域,熔解曲线高低
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1、实时荧光定量PCR仪中所谓的HRM技术是什么意思呢RT
HRM技术是high-resolution melting analysis即高分辨熔解曲线分析技术,是近年国外兴起的一种全新的突变扫描和基因分型的遗传分析方法。
HRM(High Resolution Melt) 是一种最新的遗传学分析手段,它根据目标DNA序列的长度、GC含量及碱基的互补性差异,利用高分辨率的熔解曲线对样品的基因型进行判定。
HRM(High Resolution Melt),中文译为“高分辨率熔解”。现今由于饱和染料以及温度梯度更为敏感仪器的出现,使得先前的熔解曲线的变化技术可以反映出的核酸性质的差异更为细腻,称之为高分辨率溶解曲线。
【实时荧光定量PCR技术】,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR (Quantitative Real-time PCR)是一种在DNA扩增反应中,以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应(PCR)循环后产物总量的方法。
因此利用实时PCR技术,通过实时检测dsDNA熔解过程中荧光信号值的变化,就能以生成不同形状熔解曲线的方式将PCR产物中存在的差异直观地展示出来。
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